塩基編集

Base Editing

DNAの二本鎖切断を起こさずに、狙った1塩基を別の塩基へ置き換えるゲノム編集技術。デアミナーゼをdCas9やCas9ニッカーゼに融合させて用いる。

詳細

塩基編集は、ゲノム上の特定部位で特定の塩基置換だけを行う手法で、従来のCRISPR-Cas9のような二本鎖切断(DSB)を必要としない。

仕組み — デアミナーゼ酵素を、触媒活性を失わせたCas9(dCas9)またはCas9ニッカーゼに融合させる。

  • シトシン塩基編集:シチジンデアミナーゼがシトシンをウラシルに変換し、細胞の修復機構がウラシルをチミンに置き換えることでC→T変換が完了する
  • アデニン塩基編集:改変TadA酵素がアデニンをイノシンに変換し、続いてグアニンに置き換わる

従来法との違い — 通常のCRISPR-Cas9は標的配列に二本鎖切断を作り、非相同末端結合または相同組換え修復に依存して変化を導入する。塩基編集はDSBの形成を回避するため、DSB依存の修復経路が働きにくい非分裂細胞の編集で特に有利とされる。